生物工程生產(chǎn)胰島素的步驟,。想解決目的基因如何獲???
一,、生物工程生產(chǎn)胰島素的步驟,。想解決目的基因如何獲???
1,,目的基因的獲?。和ㄟ^各種手段(基因文庫,,化學(xué)合成,PCR技術(shù)等)獲取胰島素基因
2,,基因表達(dá)載體的構(gòu)建:一般采用質(zhì)粒,,用同一種限制酶切割質(zhì)粒和切取目的基因(胰島素基因)使產(chǎn)生相同的粘性末端,將切取的胰島素基因片段插到質(zhì)粒的切口處,,再用DNA連接酶使質(zhì)粒和胰島素基因結(jié)合成重組質(zhì)粒
3,,將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞(如大腸桿菌,用感受態(tài)細(xì)胞法即Ca+處理)
4,,檢測與鑒定目的基因獲得途徑:
1限制性內(nèi)切酶酶切法
2利用PCR技術(shù)直接擴(kuò)增目的基因
3目的基因的化學(xué)合成
4通過構(gòu)建基因組文庫或CDNA文庫分離目的基因
5反向轉(zhuǎn)錄法分離目的基因
希望對你有幫助,。。,。
二,、1905年我國在國際上首次人工合成什么結(jié)晶?
1965 年9月17日,,發(fā)生了寫入中學(xué)化學(xué)教材的這件大事——上海生物化學(xué)研究所首次人工合成結(jié)晶牛胰島素,,這也是世界首次合成具有活性的人工蛋白。
1958年,,中科院提出了“完成世界上第一次人工方法合成蛋白質(zhì)”的目標(biāo)之后,,這一提議得到各級部門的支持。同年12月,,項(xiàng)目正式啟動,。當(dāng)時的中國學(xué)界可以用“一窮二白”來形容。
要人工合成蛋白質(zhì),,蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)是什么,?生物活性是什么?物理特性是什么,?這幾個標(biāo)準(zhǔn)就成為先要搞清的問題,。所以,美好愿望的實(shí)現(xiàn)首先轉(zhuǎn)化為對“美好”標(biāo)準(zhǔn)的研究,而選擇胰島素作為人工合成蛋白的對象在當(dāng)時更如“云里霧里”,。
由王應(yīng)睞等專家組成的團(tuán)隊(duì)先是對上述問題展開了攻關(guān),,隨即利用當(dāng)時簡陋的條件解決了氨基酸原料的供應(yīng)問題及硫硫鍵能否重新鏈接成胰島素蛋白分子的難題。
最終,,歷經(jīng)7年的日夜奮斗以及無數(shù)的波折,,我國的科研團(tuán)隊(duì)終于完成了世界首次人工合成牛胰島素,這也是多肽鏈物質(zhì)首次被人工合成,。
結(jié)晶牛胰島素的合成有著極其重要的意義,,它代表人類向合成有生命活性蛋白質(zhì)領(lǐng)域邁開了重要的一步。后世學(xué)界也評價此次合成工作是中國科研工作者最接近諾獎的一次,。但冷靜的思考,,此次合成工作沒有獲得諾獎也有內(nèi)在的原因。
首先,,諾獎只頒給個人,,而此次工作由團(tuán)隊(duì)完成,沒有人會將此功居為己有,,所以即便獲獎也不會有人去領(lǐng)獎,;
第二,縱觀諾獎歷史,,以表彰學(xué)術(shù)貢獻(xiàn)為初衷的評選也從未真正的公平,,即便這次世界首次人工合成牛胰島素的學(xué)術(shù)價值再大、對人類社會的貢獻(xiàn)再大,,和諾獎“擦肩”也十分正常,。
三、糖尿病患者選擇藥物的原則是什么
治療糖尿病用到的藥物多種多樣,,隨著這些藥物不斷的推陳出新,,藥物的選擇也是由
講究的,為了能讓糖尿病患者少走彎路,,找到適合自己的藥物,,了解選藥的標(biāo)準(zhǔn)很重要。
下面是糖尿病治療專家提出的選擇降糖藥的一些原則:
一,、根據(jù)糖尿病的不同類型選藥:1型糖尿病患者自始至終都應(yīng)使用胰島素治療,。2型糖尿病患者一般選用口服降糖藥治療。但在下列情況下需用胰島素治療:1,、飲食,、運(yùn)動及口服降糖藥效果不好;2、出現(xiàn)嚴(yán)重急,、慢性并發(fā)癥(如酮癥酸中毒,、糖尿病視網(wǎng)膜病變,、尿毒癥);3、處于急性應(yīng)激狀態(tài)(如嚴(yán)重感染,、大型創(chuàng)傷及手術(shù)、急性心腦卒中等)4,、懷孕期,。
二、根據(jù)2型糖尿病的自然病程選藥:在2型糖尿病早期,,胰島素抵抗伴代償性的胰島素水平升高,,首先應(yīng)該考慮選擇改善胰島素抵抗和(或)延緩葡萄糖吸收的藥物。隨著病情進(jìn)一步發(fā)展,,患者胰島素分泌功能逐漸衰退,,此時需再加用促進(jìn)胰島素分泌的藥物。
三,、根據(jù)高血糖類型選藥:如果空腹血糖不高,,只是餐后血糖高,則首選糖苷酶抑制劑(如拜糖平)或苯甲酸衍生物(如諾和龍);如果空腹和餐后血糖都高,,治療開始即可聯(lián)合兩種作用機(jī)制不同的口服藥物,,如“磺脲類+雙胍類”或者“磺脲類+噻唑烷二酮(羅格列酮和吡格列酮)類”。另外,,對于初始時空腹血糖大于13.9mmol/L,、隨機(jī)血糖16.7mmol/L的患者,可給予短期胰島素強(qiáng)化治療,,消除葡萄糖毒性作用后再改用口服藥,。
四、根據(jù)體型選藥:理想體重(千克)=身高(厘米)-105,,如果實(shí)際體重超過理想體重10%,,則認(rèn)為體型偏胖,首選雙胍類或拜糖平,。因?yàn)檫@類藥物有胃腸道反應(yīng)和體重下降的副作用,,對于超重或肥胖患者來說,正好化害為利;如果實(shí)際體重低于理性體重10%,,則認(rèn)為體型偏瘦,,應(yīng)該優(yōu)先使用胰島素促分泌劑(包括磺脲類和苯甲酸衍生物(如諾和龍),因?yàn)樵擃愃幬镉兄麦w重增加的副作用,,對于消瘦者,,正好一舉兩得。
五,、根據(jù)年齡選藥:由于老年糖尿病患者對低血糖的耐受能力差,,因此,,不宜選用長效、強(qiáng)力降糖藥物(如優(yōu)降糖),,而應(yīng)選擇服用方便,、降糖效果溫和的短效降糖藥物(如諾和龍、糖適平),。另外,,為了避免低血糖帶來的風(fēng)險(xiǎn),老年糖尿病的血糖控制目標(biāo)適當(dāng)放寬,。兒童1型糖尿病主要用胰島素治療;二甲雙胍是目前唯一被美國FDA批準(zhǔn)用于兒童2型糖尿病治療的口服降糖藥,。
六、根據(jù)有無合并癥選藥:如果糖尿病患者同時伴有肥胖,、高血壓,、高血脂、冠心病等疾病,,首先考慮使用雙胍類,、噻唑烷二酮類和糖苷酶抑制劑,這些藥物既可降低血糖,,又能改善心血管病的危險(xiǎn)因素;如果糖尿病患者有胃腸道疾病,,最好不要使用雙胍類和糖苷酶抑制劑;如果患者有慢支、肺氣腫,、心衰等缺氧性疾病,,禁用雙胍類藥物,以免引起乳酸酸中毒;如果患者有肝病,,慎用噻唑烷二酮類;如果患者有輕度腎功能不全,,最好選用主要經(jīng)膽道排泄的降糖藥如糖適平、諾和龍;如果嚴(yán)重的心肺腎等全身性疾病,,則最好使用胰島素,。
七、根據(jù)糖尿病患者對服藥的依從性選藥:對于經(jīng)常出差,,進(jìn)餐不規(guī)律的糖尿病患者,,選擇每天只需服藥一次的藥物(如格列美脲)更為方便適合?;颊唔槕?yīng)性更好,,對于經(jīng)濟(jì)不寬裕的患者,還要將價格因素考慮在內(nèi),,以確?;颊吣軌蚓S持長期治療。
糖尿病患者只有選擇適合自己的降糖藥物,,才能更好的控制自己的病情,,但是,,糖尿病治療專家說到,這些只是一個大概的范圍,,如果說情況特殊的話,,還是要先咨詢醫(yī)生。
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